Devinto tipo T limfocitų pagalbininkų bei eozinofilų apoptozės vaidmuo sergant alergine astma

2016-09-28

Dr. Deimantė Hoppenot

LSMU MA Pulmonologijos klinika

 

2016 metų gegužės 4 d. Lietuvos sveikatos mokslų universiteto Medicinos akademijos viešame Medicinos mokslo krypties tarybos posėdyje Deimantė Hoppenot sėkmingai apgynė daktaro mokslo laipsnio disertaciją „Devinto tipo T limfocitų pagalbininkų bei eozinofilų apoptozės vaidmuo sergant alergine astma“. Disertacija rengta 2011–2016 m. Lietuvos sveikatos mokslų universiteto Medicinos akademijos Pulmonologijos klinikoje.

 

2011–2015 m. mokslinis vadovas: prof. dr. Raimundas Sakalauskas.

2015–2016 m. mokslinis vadovas: prof. dr. Kęstutis Malakauskas.

 

 

Astma yra lėtinė kvėpavimo takų uždegimo liga, kurios paplitimo ir sergamumo rodikliai pastaraisiais metais pastebimai didėja daugelyje išsivysčiusių šalių, tarp jų – ir Lietuvoje. Astmos metu atsiranda lėtinis neinfekcinis kvėpavimo takų uždegimas, kurį dar labiau sustiprina aplinkos alergenai, orų kaita, kvėpavimo takų infekcijos arba fizinis krūvis. Pasaulio sveikatos organizacijos duomenimis, astma serga apie 300 milijonų žmonių ir sergančiųjų šia liga kasmet vis daugėja. Oficialiais Lietuvos statistikos duomenimis, sergančiųjų astma skaičius per pastaruosius metus taip pat didėja – 2014 m. užregistruota 44,6 astmos atvejų, tenkančių tūkstančiui Lietuvos gyventojų, tuo tarpu 2011 m. buvo užregistruota tik 36,2 atvejų, tenkančių tūkstančiui Lietuvos gyventojų. Nors astma yra viena seniausiai tyrinėjamų ligų, jos patogenezė tebėra nevisiškai aiški. Žinoma, kad astmos patogenezėje dalyvauja įgimto ir įgyto imuniteto komponentai, tačiau sergant astma vykstantys mechanizmai iki šių dienų nėra iki galo aiškūs, todėl tolesni astmos patogenezėje dalyvaujančių ląstelių tyrimai išlieka aktualūs ir svarbūs. Neseniai atrasta T limfocitų pagalbininkų subpopuliacijai priklausanti ląstelė (Th9), kuri, manoma, yra viena iš pagrindinių interleukino-9 (IL-9) gamintojų ir dalyvauja alerginio uždegimo patogenezėje. Th9 limfocitai atrasti vykdant eksperimentinius tyrimus su ląstelių kultūromis, po to šios ląstelės atrastos graužikų, o vėliau ir žmogaus organizme. Kadangi tyrimai pradėti vykdyti neseniai, Th9 limfocitų vaidmuo sergant alerginėmis kvėpavimo takų ligomis mažai ištirtas. Ypač mažai mokslinių duomenų apie žmogaus Th9 limfocitus bei jų vaidmenį lėtinio neinfekcinio alerginio uždegimo metu. Lietuvos sveikatos mokslo universiteto Medicinos fakulteto Pulmonologijos klinikoje 2011–2016 m. vykdytas mokslinis tyrimas, kuriame siekta nustatyti devinto tipo T limfocitų pagalbininkų (Th9 limfocitų) bei eozinofilų apoptozės vaidmenį sergant astma.

 

Metodika

 

Iš viso ištirti 53 suaugę sergantieji alergine astma (AA, tiriamoji grupė), 29 – alerginiu rinitu (AR, palyginamoji grupė) bei 36 sveiki asmenys (kontrolinė grupė). Statistinei analizei naudoti 47 alergine astma sergančiųjų, 29 alerginiu rinitu sergančiųjų bei 30 sveikų asmenų duomenys. Visiems tiriamiesiems taikyti šie atrankos kriterijai: nerūkantys 18–50 m. vyrai ir moterys, sergantieji alergine astma ir alerginiu rinitu, kurių simptomų trukmė ≥1 metai ir kuriems nustatyti teigiami odos dūrio mėginiai su namų dulkių erkės Dermatophgoides pteronyssinus (D. pteronyssinus)5 žolių mišinio ar beržų alergenais, sergantiesiems astma nustatytas teigiamas bronchų provokacijos mėginys su metacholinu ar teigiamas bronchų dilatacijos mėginys, o forsuoto iškvėpimo tūris per pirmąją sekundę (FEV1) ≥70 proc. normos. Į kontrolinę grupę įtraukti nerūkantys sveiki asmenys, kuriems nenustatytas įsijautrinimas alergenams, nesergantys jokiomis ūmiomis ar lėtinėmis uždegiminėmis bei sisteminėmis ligomis. Visi tyrimo dalyviai informuoti apie mokslinio tyrimo tikslą ir eigą, o sutikimą dalyvauti jame patvirtinę raštu. Tyrimo dalyviams taikyti šie neįtraukimo kriterijai: aktyvūs klinikiniai sezoninės alergijos simptomai, kliniškai reikšmingos nuolatinės alergijos simptomai (pvz., sukeltos katės ar šuns epidermio alergenų), aktyvi infekcija vieno mėnesio laikotarpiu, vartojami vaistai iki tyrimo pradžios: gliukokortikoidai (inhaliuojamieji, intranazaliniai, geriamieji) trumpiau nei 1 mėn., antihistamininiai vaistai – trumpiau nei 7 d., trumpai veikiantys β2 agonistai – trumpiau nei 12 val., ilgai veikiantys β2 agonistai – trumpiau nei 24 val., nėštumas, rūkymas. Th9 limfocitai analizuoti tėkmės citometru (FACSCalibur, BD Biosciences, USA). Th9 limfocitai vertinti kaip CD4+ IL-9+ IFNᵧ- TGFβ1- IL-4-IL17- ląstelės. Eozinofilų apoptozė taip pat analizuota tėkmės citometru naudojant CellQuest programinę įrangą, o IL-9 kraujo serume nustatytas imunofermentiniu ELISA metodu pagal gamintojo rekomendacijas.

 

Tyrimo eiga

 

Tyrimas vyko Lietuvos sveikatos mokslų universiteto Pulmonologijos klinikoje. Atrankos vizito metu (pirmasis vizitas) patikrinti įtraukimo ir neįtraukimo į tyrimą kriterijai, visiems tyrime dalyvaujantiems pacientams atliktas plaučių funkcijos tyrimas, bronchų provokacija su metacholinu ir alerginiai odos dūrio mėginiai. 24 val. iki bronchų provokacijos su savituoju alergenu atlikta spirometrija, paimtas periferinis kraujas, atliktas citologinis periferinio kraujo ląstelių tyrimas, tirti periferinio kraujo Th9 limfocitai ir su jų aktyvumu susiję transkripcijos veiksniai STAT6 ir PU.1.

Plačiau apie tai skaitykite „Pulmonologija, imunologija ir alergologija“ 2016 Nr.2

 

© 2006 Visos teisės saugomos.